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科研血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。古朵生物技术介绍一下在科研血清实验中常见的一些问题。

要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。

将收集于分离管的全血样本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000x g 离心20min, 收集上清。这是一个让血液自然凝固的过程，温度越低，凝集越缓慢，可根据需要添加促凝剂。

古朵教您如何辨别ELISA试剂盒好坏的四大办法

如今检测ELISA试剂盒有许多途径，我们可以根据自己的偏好进行选择。一般ELISA检测的是酶促反应的可溶性产物，抗体上结合有相应的酶，而反应体系中添加有相应的底物。这种酶促反应生成具有特征性的颜色，可以通过分光光度计进行检测，碱性磷酸酶ap也是一种常用酶。

质粒提取量与细菌浓度及质粒拷贝数等因素有关，低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒提取时应加大细菌使用量。

利用二抗标记的 HRP，催化 TYR 荧光探针反应结合至抗原蛋白周围分子上，共价标记蛋 白上，运用 HRP 二抗及一抗在微波热修复条件下脱离掉抗原失活的原理，重复此过程，即可实现同 种属荧光双标及荧光三标以及多标(备注：此过程仅适合石蜡切片的荧光多标)。

抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。

免疫组化染色对切片有三方面的技术要求

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姬姆萨染色液(Giemsa stain,即用型)产品说明

实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。

温育这一步是ELISA测定中最容易出现问题的步骤。目前国内ELISA试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟-1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1-2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。

做干细胞三系分化实验的小伙伴，想必对油红O染色、茜素红染色和阿利辛兰染色法很熟悉了，今天来介绍另一种细胞实验常用的染色方法，即苏木j——伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining)，简称HE染色法。

严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温标准。使用后立即冷藏保存试剂。

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