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古朵分析ELISA实验出现异常的原因

人阅读 发布时间:2023-08-22 15:12

  古朵分析ELISA实验出现异常的原因
 

  ELISA实验是我们大家最常见的实验,也是比较容易出问题的实验,可能你一不小心,你的整个实验便是无功能重来那!古朵生物给您讲解在使用ELISA试剂盒做实验的时候,有些细节若是做不好会出现实验异常,或者效果不佳,那么你有想过是什么原因吗?

  一、白板异常:显色步骤结束后,酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。

  1. 试剂已过效期,或不同试剂盒组分混用(解决方式:检查试剂的组分及批号,确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用)。

  2. 错加、漏加试剂底物、显色剂 A或B(解决方式:严格按说明书的步骤操作,加完试剂后可观察一下液面高度是否一致,以减少漏加现象)。

  3. 洗板及加样过程中,酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力(解决方式:确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净)。

  4. 终止液误作洗涤液稀释或当底物缓冲液配制(解决方式:每次配制时都应看清标签标明物质)。

  5. 蒸馏水有问题(解决方式:确认配制洗液的纯化水达到要求且未污染,与好蒸馏水比较)。·显色弱、灵敏度低:实验结束后,包括阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。

  二、阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出。

  1. 未达要求的孵育温度及孵育时间可检出强阳性标本,但质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出(解决方式:质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的,可存于 2-8℃,如需长期保存,应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装,并置于-20℃以下保存)。

  2. 质控品或标本高温放置过久,或被反复冻融致待测物滴度下降,而未能检出(解决方式:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配)。

  3. 仪器设定不正确,滤光片不匹配(解决方式:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配)。

  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。

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