古朵生物操作ELISA试剂盒技术常识细节讲解
 

　　试剂盒的配制:

　　对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节.在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子.根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶.一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml.可利用标准的ELISA操作流程 放大试剂盒 第三类试剂 或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度.为了优化灵敏度,建议孵育标准品和标本.若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠d钠可抑制过氧化物ELISA试剂盒酶的活性.

　　注意事项:

　　1. 浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟;

　　2. 使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟.

　　3. 保存于2-8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示.什么是ELISA试剂盒的回收率?是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度.比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20 mg/L,取mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/L,则认为回收率为98%.对于定量检测来说,主要还是一个准确度的验证.不过我看到别人写的内容比我自己想说的要好,所以就贴上去了.相对回收率可能会高于%的,如果只是说“损失程度”,其实是不准确的.应该说,回收率越接近%,说明这个试剂盒的准确度越高.

　　ELISA检测时样本实验准备步骤：

　　在ELISA试剂盒收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。液体类标本： 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

　　血清：

　　室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　血浆：

　　应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　尿液：

　　用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

　　细胞培养上清：

　　检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右-3000转/分)。仔细收集上清。

　　培养细胞

　　检测细胞内的成份时，用PBS(PH7。2-7。4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　组织标本

　　切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7。4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7。4)，或组织蛋白萃取试剂， 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

　　ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。