知识分享：酶联免疫检测试剂盒操作步骤与注意事项
 

　　酶联免疫检测试剂盒操作步骤：

　　一、试剂准备

　　1.使用前将所有试剂平衡至室温。

　　2.洗液：如果浓缩液中已经形成结晶，平衡至室温，并轻轻地摇晃直到结晶*溶解。加入去离子水或蒸馏水稀释20ml浓缩洗涤液至500ml。

　　3.底物溶液：显色试剂A和B应该在使用前15min以等体积混合。避光保存。每孔需要200ul生成的混合物。

　　4.IL-6标准品：使用5ml标准稀释液RD5T(适用于细胞培养上清液样本)或标准稀释液RD6F(适用于血清/血浆样本)重新配制IL-6标准品。重新配制的产品为300pg/ml贮存液。稀释前允许将标准品至少轻轻搅拌15min。

　　5.吸取适当的标准稀释液667ul到pg/ml EP管，500ul稀释液到其它 EP管中。适用贮存液配制一系列的稀释液(如下)。进行下一次转移前充分地混匀各个EP管。没有稀释的标准品作为高标准。适当的标准稀释液作为0标准(0pg/ml)。

　　注意：使用时戴眼睛、手、脸和衣服的防护。

　　二、酶联免疫检测试剂盒的注意事项：

　　1.酶联免疫检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

　　2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

　　3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

　　4.酶联免疫检测试剂盒请每次测定的同时做标准曲线，好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6.底物请避光保存。

　　7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

　　8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

　　9.本试剂不同批号组分不得混用。

　　10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

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