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古朵阐述:科研血清实验中常见问题及解答

人阅读 发布时间:2023-08-28 15:26

  古朵阐述:科研血清实验中常见问题及解答
 

  科研血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。古朵生物技术介绍一下在科研血清实验中常见的一些问题。

  1、如何贮存和冻结血清才不会使产品质量受损?

  将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但有必要注意的是,融解过程中有必要规矩地摇晃均匀。长时刻贮存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而构成沉积或可见的混浊。因而,推荐在-20℃以下贮存血清,并防止反复冻融。主张血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,主张无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

  2、血清中包含絮状沉积,它们是什么,怎样处理?

  这些沉积包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除掉沉积,离心血清(400g,1-2分钟)或许简单的让其沉积在瓶子底部,将血清小心地转移到另一个无菌瓶里(一般不主张选用过滤的办法除掉沉积,由于沉积会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉积并加热至37℃就会再溶解。所以,运用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉积会天然消失。

  3、如何防止血清中发作沉积?

  按如下操作可防止沉积的发作:

  (1)冻结血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,削减沉积的发作。

  (2)血清分装冻存时,须规矩摇晃均匀(当心勿形成气泡),使温度与成分均一。

  (3)勿直接由-20℃直接至37℃冻结,因温度改变太大,简单形成蛋白质凝结而发作沉积。

  (4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得污浊,一起血清中许多较不稳定的成份也会因而受到破坏,从而影响血清的品质。

  (5)若有必要做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时刻过久或摇晃不均匀,都会形成沉积物的增多。

  在ELISA实验的过程中,血清培养是很重要的步骤,但是在这过程中也会出现一些的问题,比如说,在培养进程中会出现一个个“小黑点”的现象,这是怎样一回事呢?接下来就为大家解析一下这个现象出现的原因以及解决方法。

  我们一旦发现培养基中有黑点,我们先不要着急,也不要慌张,要搞清楚这个黑点是什么?什么构成的?首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状况,黑点是否游动等。如果细胞被污染,微生物则会不断繁衍,培养基就会敏捷变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状况出色,与黑点出现前比较,没有任何改变,那么,黑点的出现或许与以下几种状况有关:第一,细胞生长过老,黑点是破碎的细胞残骸;第二,血清质量欠好,重复冻融的效果;第三,制作培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;第四,制作培养基的水质、容器不合格(可应用离心、过滤的方法去除这些黑点);第五,培养的原代细胞中出现小黑点(或许是原代组织中的杂质,屡次传代能够消除)。

  那么我们怎样防止黑点生成呢?一般要做到以下几点:

  (1)尽可能减少血清冻融次数。

  (2)培养基无需37℃水浴。

  (3)培养基保持PH值7.0- 7.2。

  (4)严格控制制作培养基的水质,容器定时冲刷。

  (5)掌握细胞传代的机会,细胞切勿生长过老。

  血清 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。

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