荧光定量PCR技术服务

　　实时荧光定量PCR技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法，目前在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用，南京钟鼎生物技术公司使用SYBRgreen法或者 Taqman 法对 DNA/RNA 进行 real time PCR 的定量测定或型的鉴定。

　　SYBR Green荧光染料法：适用于任何DNA，无需设计探针，采取双标准曲线法，实验周期短，结果重复性好，灵敏度高。

　　TaqMan荧光探针法：经验丰富的实验技术人员设计探针，对目标基因有高特异性，实验重复性好，相对于SYBR Green法，灵敏度更高。

　　荧光定量PCR技术服务

　　服务项目

　　RNA提取，反转录

　　RNA专区操作，进口试剂，规范操作，确保反应模板品质

　　样品数量：

　　10个样品以下

　　10-20个样品

　　20-30个样品

　　30个样品以上

　　样品量>100mg

　　基因检测

　　Light Cycler定量PCR仪器，圆形反应热室，无边缘效应，灵敏度更高，三孔重复。

　　荧光定量PCR绝对定量PCR-标准曲线绘制：

　　绝对定量是用已知浓度的标准品绘制标准曲线来推算未知样品的量。一般我们将待测的基因序列装入已知大小的质粒中作为标准品，将标准品稀释至梯度浓度，作为底物模板进行荧光定量PCR反应。以标准品拷贝数的对数值为横坐标，以测得的CT值为纵坐标，绘制标准曲线。当检测未知样品时，使用与标准质粒相同的反应条件和相同的引物序列，扩增得出CT值，即可在标准曲线中计算出样品中目的基因拷贝数。

　　荧光定量PCR服务流程

　　1、根据基因序列设计特异性的引物或荧光探针

　　2、提取样品 DNA/ RNA、电泳、反转录

　　3、RealTime PCR(荧光定量PCR)，进行扩增曲线、溶解曲线、表达量差异分析等实验

　　4、实验完成后，提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料

　　荧光定量PCR样品要求

　　为了更好的为您服务，请提供尽量多的、新鲜的、保存完好的实验组织材料或模板材料，将待检测的目的基因序列或Genebank ID发送至order@zoonbio.com，尽可能提供DNA/RNA来源、丰度等。

　　荧光定量PCR实验实例：

　　1、RNA提取实验，钟鼎生物特色提取试剂盒，专区操作，提取的RNA质量更胜一筹。RNA的质量在荧光定量PCR检测实验中非常重要，虽然荧光定量PCR的产物较小，即使在RNA不完整或有降解的状态下，其反转录的产物的扩增曲线依然可用，但为了让数据更加接近真实，我们仍然希望提供新鲜的材料，使用严谨的RNA提取方法获得高品质的RNA。

　　2、荧光定量PCR反应，钟鼎生物采用的罗氏经典的lightCycler荧光定量PCR仪器，无边缘效应，能更大程度上反应样品中的相对含量，下图为使用仪器自带软件导出的扩增曲线和溶解曲线图，通过图形即可初步判断扩增效率及扩增产物的特异性，我们会为每一个样品拟合扩增曲线及溶解曲线，提供原始的分析数据。

　　3、荧光定量PCR实验数据分析，每样品分三复孔平行检测，交付报告中直接分析原始数据，计算相对表达量，并以客户指定的样品为标准进行相对定量数据分析。由于样品的特异性，RNA的完整性，引物扩增的效率等因素，荧光定量数据并非100%精确的反映基因的绝对含量，其相对数据只能为基因表达量的判断提供参考。此外，钟鼎生物严格按照荧光定量PCR实验操作流程进行实验，其数据为实验数据的真实反映，我们不承诺分析得到的荧光定量相对定量数据与客户的理论预期100%一致。

　　荧光定量上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。