DNA琼脂糖凝胶电泳时上样缓冲液的量您了解吗？
 

　　琼脂糖凝胶电泳上样量，一般取决于琼脂糖凝胶的大小和浓度，以及DNA的浓度和纯度等因素。通常而言，琼脂糖凝胶电泳的上样量应该在0.1至1.0 μg之间。

　　如果上样量太低，DNA条带可能会过于模糊且难以读取，无法得出准确的结果;而如果上样量太高，则会使得DNA条带过于密集而无法区分，也会影响结果的准确性。因此，确定适当的上样量是进行琼脂糖凝胶电泳实验的关键因素之一。

　　下面是一些常见的上样量推荐：

　　1. 载体DNA：10 ng至1 μg

　　2. PCR产物：10 ng至1 μg

　　3. 高分子DNA：约50-100 ng

　　4. 短DNA片段：1 ng至50 ng

　　5. 细菌基因组DNA：100 ng至1 μg

　　琼脂糖凝胶电泳原理：

　　琼脂糖凝胶电泳的原理：是以琼脂糖为介质,对不同大小的DNA或RNA实现分离的一种电泳方法。

　　1、琼脂糖是线性的多聚物，基本结构是1,3连结的β-D-半乳糖和1,4连结的3,6-内醚-L-半乳糖交替连接起来的长链。以半乳糖苷和半乳糖酐分子存在于蜗牛蛋白腺体、蛙卵、脑神经组织等动物材料中。游离态见于乳汁。与葡萄糖结合构成乳糖。经硝酸氧化后可得黏液酸。

　　2、琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解，温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶。琼脂糖具有亲水性，并几乎完全不存在带电基团，对敏感的生物大分子极少引起变性和吸附，是理想的惰性载体。

　　3、琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示;强度越高，凝胶性能越好。琼脂糖凝胶电泳是实验室常用的技术之一，广泛运用于DNA与RNA的鉴定和分离。由于琼脂糖凝胶是通过氢键的作用，因此过酸或过碱等破坏氢键形成的方法常用于凝胶的再溶化，象NaClO4能用于凝胶的裂解，一般的凝胶回收试剂盒利用的也是这一原理。

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