古朵生物DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒(20×)您实验过吗？

　　产品名称：DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒(20×)

　　规格：2×10ml/2×3ml

　　供应商:古朵生物

　　分类：免疫印迹

　　储存条件:—20℃,避光,12个月

　　产品用途：Western blot、免疫组化中的DAB显色。

　　注意事项：主要由DAB孵育液、氧化剂组成,20倍稀释混合后使用,染色后呈棕色。。

　　DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒(20×)操作注意事项：

　　1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

　　3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

　　4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

　　5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

　　6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

　　7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

　　8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

　　9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

　　DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒(20×)特点：

　　1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。

　　2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。

　　3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。

　　4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。

　　5.可以定量测定。溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。

　　6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测，免疫酶技术都能在较短时间内完成。

　　7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置.

　　样本处理及要求：

　　1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

　　2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

　　3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

　　4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

　　6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

　　7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

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