猪ELISA试剂盒操作过程及使用注意事项

　　猪ELISA试剂盒

　　我们曾使用本室能得到的含浓度(约2mg/m1)HBsAg的血清样本对目前国内较大的试剂生产厂家的“一步法”HBsAg测定猪ELISA试剂盒的“钩状效应”进行了评价，尽管大部分有在HBsAg浓度下的测定显色较次高浓度(1：lo稀释)显色要浅的现象，但均未出现该份样本测定为阴性的情况。尽管如此，在临床实际工作中，仍有可能遇到“钩状效应”较严重的HBsAg测定猪ELISA试剂盒，我们也经常听到基层实验室同行在这方面的反映。因此，大家还应该重视这方面的问题·，当发现测定结果明显与临床不符或与相关测定指标互有矛盾，如 HBeAg阳性样本HBsAg测定为阴性时，就应考虑HBsAg测定可能存在的“钩状效应”问题。

　　综上所述，一步法猪ELISA试剂盒作为迎合临床实验室简便快速要求的产物，有着巨大的市场，其虽有潜在缺陷，易导致含高浓度待测物的标本检测为阴性(假阴性)，但精心的实验设计，对包被和酶标记抗体仔细选择，完全可以将“钩状效应”出现的可能性降至。此外，建议生产HBsAg，aFP和hCG猪ELISA试剂盒"一步法”测定试剂盒的厂家，应对所产的试剂在出厂前对其“钩状效应"(hookeffect)进行充分的研究，并提醒用户在使用时应注意之处。

　　双抗体夹心法测抗原另一个所需要注意的是类风湿因子(RF)的干扰。我们知道，RF是一种抗变性IgG的自身抗体，主要为19S的IgM类抗体，也可见7S的IgG及IgA类抗体。这种自身抗体的特性是其是能与多种动物的变性IgG的Fc部分结合。因此，如果血清标本中含有RF，在双抗夹心猪ELISA试剂盒检测时，其即可作为固相抗体和酶标抗体(均为IgG)之间的桥接抗原，而产生假阳性反应。因此，如果使用抗体的Fab2：或Fab片段作为酶标记用抗体，则可避免RF的干扰。

　　ELISA试剂盒操作过程：

　　1.取出酶标板，设空白孔，按照次第对应别离参加100μl的规范品于空白微孔中(空白孔视为0号规范品，用医用蒸馏水代替)

　　2.别离标记样品编号，参加100μl的稀释样品于空气微孔中(不同的样本选用不同的吸头)。

　　3.将酶标板置于37℃温育30分钟

　　4.将酶标板板取出，将其间的液体甩去，每个孔中悉数加满使用洗刷液后，当即甩去液体。

　　5.每个孔中加满使用洗刷液后，细微振摇酶标板30秒后将孔中的使用洗刷液甩去，在吸水纸大将酶标板拍干。

　　6.重复第5个过程5次，在吸水纸大将酶标板拍干。

　　7.在规范品孔和样品孔中参加的100μl的酶标巧合溶液。

　　8.将96孔板置于37℃温育30分钟。

　　9.将酶标板取出，将其间的液体甩去，每个孔中悉数加满使用洗刷液后，当即甩去液体。

　　10.每个孔中再次加满洗刷使用液后，室温细微振摇酶标板30秒后将孔中的使用洗刷液甩去，在吸水纸大将酶标板拍干。

　　11.重复第5个过程5次，在吸水纸大将酶标板拍干。

　　12.在每个孔中参加底物A 50μl后当即参加底物B 50μl。悄悄振动混匀。(A液.B液使用不同的吸头加样)

　　13.将酶标板置于37℃避光温育反响15分钟。

　　14.每个微孔中参加50μl的停止液，悄悄振动混匀。

　　15.在酶标仪上，450nm处测定OD;显色后，15分钟内进行测定。

　　16.依据制备的规范曲线，核算样本含量。

　　猪ELISA试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。古朵试剂盒

　　标签：猪ELISA试剂盒 试剂盒 抗体 抗原 试剂 血清 猪试剂盒