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古朵快讯:抗体和重组蛋白的使用及该如何保存的方法
人阅读 发布时间:2023-10-07 15:05
抗体和重组蛋白的使用及该如何保存的方法
关于抗体和重组蛋白的使用方法和该如何保存的方法的介绍。
不管是储存还是运输,均应避免冻融 。冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构,导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象变化,从而降低抗体的结合 能力 ,并加速抗体和重组蛋白的降解 。
正确地保存抗体和重组蛋白,直接影响到抗体和重组蛋白的活性使用 效果 ,如果保存得当,大多数抗体和重组蛋白的活性都能保持多年 。
1.在接收 到抗体 和重组蛋白后操作 。
接收 到抗体 和重组蛋白后(大部分 抗体 和重组蛋白都是 溶于 液体 ),一定要在4℃12000 rpm,离心 3分钟 ,然后 打开 盖子 进行 分装 、溶解 和保存 (若抗体 和重组蛋白体积 小于 50 ? l,请将离心 时间 延长 到5分钟 ,以确保 所有 的抗体 和重组蛋白都被离心 ,干粉 状态 同样 适用 )。 抗性 和重组蛋白采用 专门 的贮存 管,只需经12000 rpm离心 3分钟 ,就能将附着 在管壁 或盖子 上的抗体 和重组蛋白全部 离心 (甚至 10000 rpm离心 也会不* 离心 ,导致 抗体 和重组蛋白数量 不足 )。 请仔细阅读 说明 ,按照 建议 的保存 条件 正确 保存 和使用 抗体 和重组蛋白。
2.抗体 及重组蛋白经久 保存 。
对大多数 抗体 和重组蛋白,较适宜 的保存 方法 为:抗体 分装 后保存 在-20 ℃,重组蛋白分装 后保存 在-80 ℃。
(1)分装 可-可大大减少重复 冻融 对抗体 和重组蛋白活性 的损害 ,同时 也降低 了从同一 管内 多次 吸取 抗体 和重组蛋白引起 的污染 的可能性 。
(2)分装 量较好 在一次 试验 结束 后再进行 ,少于 10 次? l每份 。 由于 重组蛋白的体积 越小,抗体 和重组蛋白的浓度 就越容易 受到 蒸发 和管壁 吸附 的影响 。
(3)复融 后的分装 抗体 和重组蛋白如一次 不用 ,应将剩余 母液 保存 在4℃,避免 再次 冻结 。
(4)抗体 及重组蛋白工作液 在配制 当天 要用完,4℃保存 的时间 不要 超过 1天。
(5)绝-避免 在自动 除霜 冰箱 中保存 抗体 和重组蛋白,在冰箱 的内层 保存 抗体 和重组蛋白,避免 温度 变化 引起 反复 冻融 。
3.抗体 和重组蛋白的短期 保存 。
大多数 抗体 和重组蛋白在4℃4℃短时间 保存 1~2周,不影响 抗体 和重组蛋白的活性 。 若能尽快 使用 抗体 和重组蛋白(1~2周),建议 在4℃保存 ,以避免 反复 冻融 对抗体 和重组蛋白的活性 造成 损害 。 重点 是按照 说明书 推选 的方法 ,正确 保存 抗体 和重组蛋白。
4. 抗体 和重组蛋白运输 条件 。
通常 运输 过程 需要 1~2个星期 ,因此需要低温 4℃条件 下。4℃ 运输主要的目的是为了避免反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体和重组蛋白是冻起来的,为了分装就需要解冻,这就多了一次冻融的过程),所以运输过程中一般避免干冰运输。
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