标签：DAB 染色液 古朵生物 免疫组化试剂盒 抗兔二抗 一抗 酶标羊抗兔IgG  稀释液


　　免疫组化试剂盒(抗兔二抗)技术资料

　　免疫组化试剂盒(100T)

　　原理： DAB 染色液是特别敏感的二步法免疫组化试剂盒，适合与兔或鼠源一抗配用。其主要过程为，一抗与切片中的靶抗原形成抗原抗体复合物，酶标羊抗鼠/兔 IgG 聚合物二抗(以多聚葡聚糖分子为骨架，辣根过氧化物酶与羊抗鼠/兔 IgG 形成的聚合物)与抗原抗体复合物中的一抗结合，再利用辣根过氧化物酶催化二氨基lb胺(DAB)在抗原部位形成棕色显色。

　　规格：100T

　　试剂盒组成：酶标羊抗兔IgG 聚合物二抗 4℃，5mL; DAB 显色剂(100x) A4℃，100ul;DAB显色缓冲液 B 4℃，10mL;3%过氧化氢，10mL;

　　使用方法：DAB显色缓冲液：DAB 显色剂(100x)=100:1; DAB显色工作液液C=A+B;

　　其他自备试剂：修复液，pbs，BSA等

　　操作流程如下：

　　石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲bⅠ15min-二甲bⅡ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸馏水洗。

　　抗原修复：组织切片置于盛满EDTA抗原修复缓冲液(PH8.0)(其他抗原修复液可以根据情况选择)的修复盒中于微波炉内进行抗原修复，中火8min至沸，停火8min保温再转中低火7min，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。

　　阻断内源性过氧化物酶：切片放入3%过氧化氢溶液(30%双y水：纯水=1:9)，室温避光孵育25 min，将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。

　　非特异性封闭:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止抗体流走)，在圈内滴加用3%BSA或者专用封闭液均匀覆盖组织，室温封闭30min。

　　加一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗工作液(可选择PBS或者一抗稀释液配制一抗工作液)，切片平放于湿盒内4°C孵育过夜。(湿盒内加少量水防止抗体蒸发)

　　加二抗：玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的酶标羊抗鼠/兔IgG 聚合物二抗覆盖组织，室温孵育50min。

　　DAB显色：玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加新鲜配制的DAB显色工作液液C，显微镜下控制显色时间，阳性为棕黄色，自来水冲洗切片终止显色。

　　石蜡切片免疫组化结果判读

　　苏木素染细胞核为蓝色，DAB显出的阳性表达为棕黄色

　　免疫组化试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。