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知识分享:免疫荧光双标技术分析的误区
人阅读 发布时间:2023-08-21 14:54
知识分享:免疫荧光双标技术分析的误区
首先是针对半定量分析在免疫荧光双标技术分析中我们没有检测到一些含量,这些免疫荧光双标技术只能通过设置参照指标,以参照指标的倍数来反映目标物相对含量,这个“相对”是针对参照的。分析结果是半定量的,也是没有单位的。
免疫荧光双标技术就是半定量分析吗,其实在实验中是不合适的,表面上看,这个过程与DAB染色后类似,但实际上其中存在相当多的变量,正是这些变量导致免疫荧光染色不适合做半定量分析。在理论上免疫荧光双标技术,得到一张蛋白条带所涉及的操作是相同的,后面对蛋白进行发光和拍照,这些也是在同一时刻进行的操作。不涉及时间差的问题。即你是在同一条件、同一时间对此条带上的不同孔进行检测。尽管也存在信号衰减的问题,但是此时所有孔代表蛋白的荧光衰减程度是一致的。
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