ELISA实验中缓冲溶液等试剂的配置
 

　　ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础，ELISA试剂以及各种溶液如何配置？最近刚做了下ELISA实验，古朵生物技术小编把各种ELISA配置方法汇总如下：
　　1、ELISA实验包被缓冲液
　　2、ELISA实验洗涤缓冲液
　　3、ELISA实验稀释液
　　4、ELISA实验终止液
　　5、ELISA底物缓冲液
　　6、ELISA实验TMB四甲基联b胺、使用液
　　7、ELISA实验ABTS使用液
　　8、ELISC

　　试剂

　　1、ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液)：

NaHCO3	1.59g
NaHCO3	2.93g
加蒸馏水至1000ml

　　2、ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS)：0.15M

KH2PO4	0.2g
Na2HPO4·12H2O	2.9g
NaCl	8g
KCl	0.2g
Tween-20 0.05%	0.5ml
加蒸馏水至1000ml

　　3、ELISA实验稀释液：
　　牛血清白d白(BSA) 0.1g
　　加洗涤缓冲液至100ml
　　或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。

　　4、ELISA实验终止液(2M H2SO4)：
　　蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸98%、21.7ml。

　　5、ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸)：

0.2M Na2HPO4(28.4g/L)	25.7ml
0.1M 柠檬酸(19.2g/L)	24.3ml
加蒸馏水50ml

　　6、ELISA实验TMB(四甲基联b胺)使用液：

TMB(10mg/5ml无水乙醇)	0.5ml
底物缓冲液(PH5.5)	10ml
0.75%H2O2	32μl

　　7、ELISA实验ABTS使用液：

ABTS	0.5mg
底物缓冲液(PH5.5)	1ml
3%H2O2	2μl

　　8、ELISA实验封闭液：
　　牛血清白d白(BSA) 5g
　　加洗涤缓冲液至100ml
　　值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉，不适合长期保存。

　　为了保证ELISA实验的准确性，实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要精确，将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔，严防交叉污染。

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