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古朵生物:组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒

人阅读 发布时间:2023-07-17 14:51

  古朵生物:组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒
 

  产品规格:100管/48样

  产品简介:

  ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助 诊断。在酸性环境中,ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯f,苯f与4-氨基安替比林和铁氰化j反应生成红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510nm吸光度增加速率,来计算ACP活性。注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。

  产品组成:

  

 

  溶液的配制:1、标准品:10μmol/mL酚标准液,临用前蒸馏水稀释至2.5μmol/mL备用。

  操作步骤(仅供参考):

  一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

  组织样本:称取约0.1g组织,加提取液1mL充分研磨,4℃,10000rpm离心10min,取上清液待测。

  血浆(血清):血液可直接用于测定,如果浓度高的话,用提取液稀释。

  二、测定步骤

  1.分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到510nm,蒸馏水调零。

  2.试剂一置于37℃水浴中预热30min以上。

  3.操作表:

  

 

  三、ACP活性计算

  1.按蛋白浓度计算

  活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。

  ACP酶活 (U/mg prot)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(Cpr×V样)÷T =0.167× (A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr

  2.按样本质量计算

  活性单位定义:37℃中每克组织每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。

  ACP酶活 (U/g质量)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(W÷V提取×V样)÷T =0.167×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W

  3.按血液体积计算

  活性单位定义:37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。

  ACP酶活 (U/mL)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷V样÷T =0.167×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)

  C标准品:标准品浓度,2.5μmol/mL;V样:加入反应体系中上清液体积,0.02mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;T:反应时间,15min;V提取:加入提取液体积,1mL;W:样本质量,g。

  注意事项:

  1.试剂一、试剂二和试剂三均需避光保存。

  2.试剂三变蓝绿色后不能再使用。

  3.加入试剂三后必须立即混匀,否则显色不完全。

  4.ACP不稳定,尤其在37℃和pH大于7的条件下活力丧失快,因此酸性磷酸酶样本一般需当天准备;血清样本中,每毫升血清中加入10mg柠檬酸氢二钠或者5mg硫酸氢n,使pH降至6.5以下,或5mL血清加入30%醋酸溶y2~3滴,置于4℃可保存1周。

  组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。

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