古朵介绍：关于常见细胞裂解液及其组分
 

　　在许多细胞内蛋白表达、纯化及蛋白-蛋白互作等免疫实验(如WB、IP、Co-IP、ChIP)中，细胞裂解是关键一步。

　　基本介绍

　　根据不同细胞类型、蛋白定位及下游应用，需要不同的细胞裂解液进行细胞裂解及蛋白提取(表1)。

　　表1 根据不同蛋白定位选择裂解液

　　蛋白定位 裂解液

　　全细胞 NP-40、RIPA

　　细胞质(可溶性蛋白) Tris-HCl

　　细胞质(细胞骨架等不溶性蛋白) Tris-Triton

　　细胞膜 NP-40、RIPA

　　细胞核 RIPA

　　线粒体 RIPA

　　差异化比较

　　RIPA裂解液

　　RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液，获得的蛋白样品可用于常规WB、IP等实验。

　　组分：25 mM Tris-HCl, pH 7.6、150 mM NaCl、1% NP-40、1%去氧胆酸钠、0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)。

　　IP裂解液

　　IP裂解液是一种改良后的RIPA裂解液，具中等强度效力，可高效溶解细胞蛋白，但不会像RIPA一样释放染色体组DNA或破坏蛋白复合物。适合下游免疫沉淀或亲和吸附应用。

　　组分：25 mM Tris-HCl, pH 7.4、150 mM NaCl、1% NP-40、1% mM EDTA、5% 甘油。

　　NP-40裂解液

　　NP-40裂解液是一种很温和的非离子型去垢剂，与蛋白结合力强，尤其适用于膜蛋白非变性条件下的溶解。

　　组分：50mM Tris-HCl pH 8.0、150mM氯化钠、1%NP-40;加蛋白酶抑制剂：抑肽酶、亮肽素、胃抑素，每种1μg / ml;使用前立即添加1mM PMSF。

　　Tris-Triton裂解液

　　Tris-Triton裂解液是非离子型表面活性剂，效力介于NP-40和SDS之间，下游应用有WB、ELISA、IP。

　　组分：10mM 三羟甲基氨基甲w(Tris)，pH值7.4、100mM NaCl、1mM EDTA、1mM EGTA、1% Triton X-100、10% 甘油、0.1% SDS、0.5% 去氧胆酸钠。

　　细胞裂解液上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。