葡萄糖含量检测试剂盒说明书 古朵生物

　　葡萄糖含量检测试剂盒说明书 古朵生物

　　产品简介：

　　葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物，而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的能源，而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。

　　葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在 505 nm 有特征吸收峰。

　　试验中所需的仪器和试剂：

　　可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

　　产品内容：

　　试剂一：葡萄糖 9mg×1支，4℃保存;临用前加入1ml蒸馏水充分溶解为50μmol/mL 葡萄糖溶液， 用蒸馏水稀释为 0.5μmol/mL 葡萄糖溶液-20℃ 保存;

　　试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃保存; 试剂三：液体 25mL×1 瓶，4℃保存;

　　混合试剂的配制：使用前将试剂二和试剂三 1:1 等体积混合，用多少配多少。

　　操作步骤：

　　一、葡萄糖提取：

　　1、组织的处理：称取约 0.1g 样本，加入 1mL 蒸馏水研磨成匀浆，置沸水浴中煮沸 10 分钟(盖紧，防止水分散失)，冷却后，8000g，常温离心 10min，取上清液备用。

　　2、细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个)：蒸馏水体积(mL)为 500~1000：1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 蒸馏水)， 超声波破碎细菌或细胞(冰浴，功率 20%或 200W，超声 3S，间隔 10S，重复 30 次)，置沸水浴中煮沸 10 分钟(盖紧，防止水分散失)，冷却后，8000g，25℃离心 10min，取上清液备用。

　　二、测定操作表：

　　1、分光光度计预热 30min。波长调至 505nm，蒸馏水调零。

　　2、在 1.5mL 离心管中依次加入下列试剂：

　　试剂(μL)空白管标准管测定管

　　样本100

　　试剂一100

　　蒸馏水100

　　混合试剂900900900混匀，置 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴中，保温 15min，于 505nm 波长处读取吸光度。

　　葡萄糖含量计算：

　　1、按蛋白浓度计算

　　葡萄糖含量(µmol/mg prot)=C ×(A 测定管-A 空白管)÷(A标准管-A 空白管)×V 样÷(Cpr×V样)=0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr

　　2、按样本鲜重计算

　　葡萄糖含量(µmol/g 鲜重)=C ×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) ×V 样÷(W÷V样总×V 样)=0.5 ×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) ÷W

　　3、按细菌或细胞数量计算

　　葡萄糖含量(µmol/104 cell)=C ×(A 测定管-A 空白管)÷(A标准管-A 空白管) ×V 样÷(500÷V样总×V 样)=0.001 ×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)

　　C：葡萄糖溶液浓度，0.5µmol/mL;Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL;V 样：加入的样本体积，100µL=0.1mL;V 样总：样本总体积，1mL;W：样本鲜重，g;500：细菌或细胞数量，500 万。

　　4、若 A 测定管大于 1.5，稀释后进行实验。

　　葡萄糖含量检测试剂盒说明书古朵既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生 化试剂，标准物质、天然植物提取物及中药标准品，核酸、酶、缓冲剂、显色底物，医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。 品种类超过2万种，广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。