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新日揭秘ELISA检测重点技巧有哪些

人阅读 发布时间:2020-01-10 11:40

    又是新的一天,实验不光要注意一些事项还要学会掌握技巧,而实验是要靠不断的实行来积累经验的,操作次数多了自然也就熟练了,而对于ELISA新手来说,在实验之前掌握技巧可有事半功倍效果。下面就来看看上海古朵生物今天为您推荐的文章内容:新日揭秘ELISA检测技巧有哪些。  
    

·加样步骤的经验总结:
    加样或加试剂时,请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,*个孔与zui后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)zui好控制 在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
    
·如何防止常见ELISA试剂盒样品蒸发?
    试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标 板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

·上海古朵生物技术部人员是这样配制试剂的:
    Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
    
    在ELISA测定中试剂的准备zui为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20min以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。
    在ELISA检测技巧中,上海古朵生物建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数。
    

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