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ELISA实验吸光值衰减是什么原因?

人阅读 发布时间:2020-01-02 13:36

   西北大学的高老师在操作ELISA试剂盒实验的时候发现了一个问题,于是来电向恒远生物销售人员吴咨询:加完显色液(购买)显色一定时间后,再加终止液(2M H2SO4,自己配制)后,立即测试其吸光度值,等过几分钟再测试吸光度值,发现两次测得的吸光度值发生衰减。第二次均小于第一次。

    并且,加终止液时,从*条加到第12条后,测试发现,吸光度值从1-12条逐级衰减。前提是这12条酶标板都是同一种产品,并且包被相同蛋白。

    高老师向吴详细的说明了实验中出现的情况,吴对实验的问题有了一定的了解,随后安排技术人员为高老师去,为其解决这一问题,高老师恍悟道:原来ELISA吸光度值衰减这样处理就可以啦。

    其实具体的原因也很简单,有可能是显色液的质量不够好。一般情况下,终止反应后OD值的下降前期不是很明显。终止后,吸光度值是会随着时间衰减,所以一般是加完终止液后立即测,这样比较准。

    再次分析12条显示逐级递减的原因看看是否是:
    ① 显色时间调整,如果您现在的显色时间是10MIN,那调整到30MIN,再加终止液,观察上述现
象是否出现。

    ② 终止液中加入少量甘油看下怎么样。
  ELISA试剂盒显色时间是30分钟,终止后要求在30分钟内检测,加入终止液后,zui好在加入终止液
后2到3分终内检测,这是OD值相对比较高。拟合值能达到四个9。 

 

  上海古朵生物ELISA试剂盒采用进口材料生产,专业的酶免专家,提供免费代测,数据分析,技术服务。产品远销全国各地。多年以来我们以极其苛刻的要求控制产品的质量,坚持生物科学研究与世界同步的理念。因此也得到了全国各大医院院校、三甲医院、研究所,科研机构等单位的一致认可,并发表了多篇文献。咨询订购!

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