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酶标抗体的质量鉴定与保存你了解吗?

发布时间:2018-09-07 14:21 点击次数:

1.  酶活性和抗体效价测定:

采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。

 

 

2.  酶量和IgG量:

酶量(mg/ml)=OD403 ′0.4

IgG量(mg/ml)=(OD280- OD402 ′0.42)′0.94′0.62

其中,0.42为酶蛋白本身(0.3)及结合戊er醛后增加的OD值,0.94为抗体蛋白与醛化酶结合后,OD280 约增加6%,故乘以0.94。兔IgG的OD280 =1.0时为0.62.

过dian酸钠标记法IgG量(mg/ml)=(OD280- OD402 ′0.3)′0.94′0.62

标记率= OD403 / OD280 =0.3-0.6,即一个抗体分子上结合1-2个HRP分子.标记率可以大于0.6-0.9。OD403 / OD280 =0.4,约相当于E/P=1.0。

 

 

酶标抗体的保存:

经鉴定合格的酶标抗体,由于硫化物及叠氮化物等可与酶结合,使HRP失活,因此,不能用硫化物及叠氮化物作为防腐剂,可加入等量的60%甘油,小量分装(0.5ml/支),置4℃~-30℃保存。