上海古朵详解—RIPA裂解液的配制方法

    RIPA裂解液(RIPALysisBuffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液，主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。可分为强效RIPA裂解液和普通RIPA裂解液，其RIPA裂解液的配制方法也有所不同。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。

    RIPA裂解液的配制方法

    NP-40orTriton-1001%

    TrisHCl(pH8.0)50mmol/L

    NaCl150mmol/L

    PMSF 0.1mmol/L(100μg/ml)

    Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂)1μmol/L(0.7μg/ml)

    Leupeptin（亮抑制肽）0.5mg/ml

    Aprotinin（抑蛋白酶肽）0.3μmol/L(1μg/ml)

    （注：PMSF贮存液：100mmol/L即17.4mg/ml于异丙醇中；

    Aprotinin贮存液：10mg/ml溶于0.01mol/LHEPES(pH8.0)；

    Leupeptin贮存液：10mg/ml溶于水中；

    Pepstatin贮存液10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存）

    RIPA裂解液的成分：

    RIPA裂解液(强)的主要成分为50mMTris(pH7.4)，150mMNaCl，1%TritonX-100，1%sodiumdeoxycholate，0.1%SDS，以及2mMsodiumpyrophosphate，25mMβ-glycerophosphate，1mMEDTA，1mMNa3VO4，0.5ug/mlleupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。

    RIPA裂解液(中)的主要成分为50mMTris(pH7.4)，150mMNaCl，1%NP-40，0.5%sodiumdeoxycholate。

    RIPA裂解液的配制方法有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。关于不同的RIPA裂解液以及我们生产的其它裂解液的主要特点和差异。