选择我司ELISA试剂盒！

4.1上海大学刘老师在我司订购了人细胞间粘附分子1（ICAM-1）elisa试剂盒、人肺表面活性物质相关蛋白A（SP-A）ELISA试剂盒，有的客户在订购ELISA试剂盒的时候都会问到关系ELISA试剂盒的一些问题，ELISA试剂盒主要的问题有哪些呢？

在ELISA试剂盒实验中，加底物后多长时间终止反应测定结果呢?下面就是上海古朵生物王经理为您讲解的，一般可采取以下这两种方法：

第一：任意确定一个时间，如20分钟或30分钟终止反应，测定被检标本和阳性参考标本的O.D值。

第二、制备好一批酶结合物后预试时间，在反应温度固定时，当阳性参考血清O.D值达到1.0时终止反应，记录这个时间，如30分钟，以后用本批酶结合物测定待检样品时都采用同一时间终止反应，这个办法不需要校正，比较方便。

国外在使用自动测定仪时，加底物后随时测定，每块试验板上阳性参考血清的O.D值，当其达到1.0时，立即将全板上被试标本终止反应进行测定，这样所得结果比较一致。我国也有自动酶标测定仪，但由于固相载体不够均匀，也很难用板来直接测定。

在ELISA中所加酶结合物之浓度，加后孵育时间以及加底物后孵育时间。这三个因素也是互相有影响的。一般讲，酶结合物浓度低，则要求孵育时间长些，而酶结合物浓度高则要求孵育时间短些，可根据实验的具体情况，变更不同因素，以取得良好的结果。

由于ELISA中变异因素多，对于要诊断某一疾病时，必须进行一系列实验室预试，摸索，或叫实验研究，在酶结合物已经确定的情况下，一般要求预测以下5个条件：

1.抗原包被浓度;

2.被检血清稀释度，即测剂量反应曲线;

3.抗体作用时间;

4.酶结合物作用时间;

5.底物作用时间。

一旦试验条件摸清，以后在正式测定时，必须固定条件，不要随时改变，以使试验系统保持足够的稳定性。