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碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)说明书

175 人阅读发布时间:2021-09-16 14:40

产品名称:碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)
产品分类:酶类染色
产品用途:用于石蜡切片、冰冻切片、骨髓细胞涂片、血液涂片等的碱性磷酸酶染色,又称同时偶联法
注意事项:碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨中。非特异性反应少,结果可靠。
储存条件:-20℃,避光,有效期6个月
规格:4*2ml 4*10ml 4*20ml

简介:碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适PH9.2-9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮至溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法),其原理是在PH9.2-9.8的碱性条件下,细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸和萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。该染液专门用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈红色,位于胞浆,结果较金属盐沉淀法可靠。

自备材料:
1、载玻片、湿盒
2、普通光学显微镜

操作步骤(仅供参考):
1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片入ALP固定液固定3min(梯度入水后的石蜡切片无固定),水洗。
2、滴加配置好的ALP孵育液,放入湿盒中,避光孵育15-20min,水洗。
3、苏木素染色液复染5-8min或甲基绿染色液复染3-5min。
4、水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。

临床意义:
1、类白血病反应积分明显增高,未经治疗的慢性粒细胞白血病积分明显减低。
2、急性细菌性感染积分明显增高,病毒性感染积分多正常或减低。
3、再生障碍性贫血积分常增高,PNH、MDS积分常减低。

注意事项:
1、血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,厚薄适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
2、ALP孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
3、复染时,苏木素染色液或甲基绿染色液二者取其一。
4、每次染色时,应有阳性对照片。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月
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