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技术资料/正文

羧甲基-琼脂糖凝胶 FF使用说明书

603 人阅读发布时间:2020-06-28 14:03

中文名:羧甲基-琼脂糖凝胶 FF
英文名:CM Sepharose FF
供应商:上海古朵生物
规格:100ml、500ml
凝胶类型:离子交换填料,弱酸型
结构成分:6%交联琼脂糖
粒径: 45-165μm
配基基团:carboxymethyl(羧甲基)
总离子交换量:0.09-0.13mmol/g凝胶
工作PH值:6-10
操作温度:4-40℃
性状(以下信息仅供参考):含20%乙醇,底部为乳白色胶体。
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)适用于各种带阳性电荷生物大分子的浓缩纯化等。
保存:2~8℃

技术资料图片1

羧甲基-琼脂糖凝胶 FF操作步骤
1、装柱
凝胶过滤介质的使用对装柱的要求较高,为了保证分离效果,一般通过柱子上加一个装柱器来使分离柱装满凝胶,或采用带有轴向加压装置的柱子。凝胶柱床一般高于60cm。装柱效果可用染料或丙酮-水溶液进行检验。
以下过程为通用介质装填过程。若为带有轴向加压装置的柱子,可在柱床稳定后将柱床压紧,接好管路。让所有的材料和试剂达到室温。配制缓冲液。凝胶层析上样、平衡和洗脱只用一种低盐浓度的缓冲液。
选择一根一定直径的柱子,长约30~60cm,根据柱子大小取所需量的凝胶(约为柱床体积的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1的比例)配成匀浆。不要剧烈搅动,以免搅坏微球。
将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
打开蠕动泵,让缓冲液缓慢流过,使柱床稳定。用一个装柱器辅助装柱。装完后柱床上端轻轻刮平,上好柱头。
2、平衡
让缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。
3、上样
样品用缓冲液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理,再上样。介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的,分子量大的先流出来。上样体积约为柱体积的1~2%,越小分离越好。
4、洗脱
用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。
5、再生
一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。
6、注意
在装柱、使用和保存柱子的时候,始终要避免柱子流干气泡进入。


羧甲基-琼脂糖凝胶 FF操作注意事项
1、密封贮存于4°C-28°C(保存溶液为20%乙醇),通风、干燥的地方,不能冷冻;用过的柱子贮存于4°C(20%乙醇)。
2、在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。
3、在实验过程中,请严格遵循产品说明书上的要求进行操作。
4、本产品避免与氧化剂接触;避免长时间暴露在空气中。
5、保质期:5年。
资料格式:

新建 Microsoft Word 97 - 2003 文档.doc

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