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DMEM低糖培养基(不含抗生素)配制方法!

发布时间:2018-08-07 13:56 点击次数:

DMEM低糖培养基(不含抗生素)。优势:
★溶解使用的是WFI优质水系统,具有无可比拟的质量;
★在我们标准的500ml及1L包装瓶中批量最大达2000L;
★在我们的5、10、20、50、100与200L的多种规格的BPC中批量最大达10000L;
★所有标准产品均为0.1μm过滤;
 
DMEM  是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,  DMEM细胞培养基是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(低于4500g/L)和低糖型(低于1000g/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。 这种培养基的特点:  
(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;
(2)维生素含量为依格尔培养基的4倍;
(3)含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸;
(4)含有微量的铁离子。  该类培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等细胞系的培养。

配制方法  
(1)在一个尽可能接近总体积的容器中加入比预期培养基总体积少5%的双蒸水。  
(2)在室温(20℃到30℃)的水中加入干粉培养基,轻轻搅拌,不要加热。
(3)水洗包装袋的内部,转移全部的痕量干粉到容器内。
(4)加NaHCO3到培养基中。  
(5)用双蒸水稀释到想要的体积,搅拌溶解。注意不要过分搅拌。  
(6)通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值,由于pH值在过滤时会上升0.1到0.3,因而调节pH值使它比最终想要的pH值低0.2到0.3。培养基在过滤前要保持密封。 
 
 配制培养基要注意以下问题:
●认真阅读说明书。说明书都注明干粉不包含的成分,常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的,如NaHCO3、谷氨酰胺,有些根据实验需要决定。
●配制是要保证充分溶解,NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后
●配制所用的水应是三蒸水,离子浓度很低。
●所用器皿应严格消毒。  
●配制好的培养基应马上过滤,无菌保存于4度。  
●液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基,它是一种灭菌后保证