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ELISA实验必须要注意的事项

发布时间:2018-08-03 15:43 点击次数:

       Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。


      在ELISA实验操作所要求的条件是比较严格的,无论是对实验的硬件条件还是对实验的操作人员的技术要求,都是如此。下面所提到的就是一些在进行ELISA实验时所要注意15个问题。

1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。

2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。

3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。

4、实验时,要使底物避光保存。

5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。

6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。

8、温浴时,要用封板膜封好酶标板,防止水分的蒸发。

9、洗板时,每次洗液加入后,应静置1-2分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

10、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。

11、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。

12、待检样品要澄清,否则会影响结果。

13、温浴时间应遵守试剂盒规定。

14、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。

15、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。