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红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×) 操作步骤

发布时间:2018-04-19 17:07 点击次数:

上海远慕生化试剂厂家现货供应红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×),详细为您介绍本品相关使用说明,作为一家专业代理销售生化试剂的优质商家,我们为客户提供了不同系列的生化试剂,化学试剂,动物血清,培养基,抗体,抗原,标准品对照品,生物分子,微生物,染色液,溶液,缓冲液,实验耗材及其他试剂等,品种满足于客户需求,价格实惠,欢迎选购!


红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×) 操作步骤

【操作步骤】

注意:绝大多数情况下,应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用,流式细胞术除外。

A、组织细胞样本的常规操作

1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。

2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~2min。 3、离心,弃红色上清。本步骤亦可在室温下操作。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。

5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4℃离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。

B、组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)

1、制备细胞悬液:新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,制备细胞悬液,离心弃上清。

2、裂解:加入细胞5倍细胞沉淀体积的1×RBC Lysis Buffer,轻柔吹打混匀裂解。

3、加入PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀。

4、离心5min,弃红色上清,本离心步骤亦可在室温下操作。

5、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2~4各一次。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。

C、血液样本的常规操作

1、取新鲜抗凝血,离心,弃上清。

2、 裂解:加入1×RBC Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~5min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。

3、离心:弃红色上清。本步骤亦可在室温下操作。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。

5、洗涤: 根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀;4℃离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。

D、血液样本的快速操作(无需洗涤)

1、新鲜抗凝血中加入10倍体积的1×RBC Lysis Buffer,轻轻吹打混匀,裂解4~15min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。

2、加入 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀。

3、离心,弃红色上清。4℃离心效果更佳。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。

5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
 

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